东莞食品检验工培训推荐—-前花青素的测定方法
在食品检验工培训中有部分学员的企业引进了外国的原料,其中有一种物质是前花青素,几乎所有食品检验的学员都没有接触,这些原料需要检验很多转基因繁衍的问题,其中比较突出的就是花青素的测定,在这里给参加东莞食品检验工培训专场的学员总结一下它的测定方法和测定的的过程,希望对食品检验工有所帮助。
前花青素是用水从法国沿海松树皮中提取出来的,并经过干燥的提取物的主要成分。
鉴定:
1. 颜色反应:反应后颜色为深红色。
将50mg的样品溶于1ml浓盐酸和4ml乙醇的混合溶液中,然后加热,直到混合溶液的颜色变为深红色为止。
2. 薄层色谱法:
吸附剂:硅胶60F251
展开剂:乙酸乙酯:甲酸:水=18:1:1(体积比)
显色:将磷酸和乙醇按(1:1)的体积比混合,再加入1%的香草醛,喷雾薄层板,加热1分钟,只出现前花青素的红色斑点,继续加热15分钟后,各种单体全部显色。
样品:将样品配成25mg/mg的甲醇溶液,取5μl点于薄层板上。
薄层色谱图谱
Rf 0.62 儿茶素
0.55 前花青素二聚体
0.41 前花青素二聚体
0.34 前花青素三聚体
0.26 前花青素四聚体
0-0.2 前花青素寡聚体
前花青素含量(Porter 试验)
一、原理:
前花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的分子,它氧化水解后能够生成红色的花青素离子。前花青素本身没有颜色,但是经过用热酸处理后,可以生成深红色的花青素离子。Porter试验能够定量测定前花青素在水解过程中生成的花青素离子。
二、方法:
试剂:甲醇 正丁醇 盐酸 NH4Fe(SO4)2·12H2O
仪器:分光光度计。
将10mg样品溶于10ml甲醇中。
取上述样品溶液1ml,用甲醇稀释至10ml为待测检液。
将正丁醇与38%的盐酸按照95:5的体积比混合后,取出6ml;将NH4Fe(SO4)2·12H2O用浓度为2mol/L的盐酸按照2%(W/V)的比例配制,取出0.2ml,连同前面的6ml一同加到1ml待测检液中,在加盖密封的玻璃容器中(离心管)用沸水浴加热40分钟。如果对加盖的试管进行加热有麻烦的话,可以在沸水浴加热回流。精确加热40分钟后,立即用冰水冷却试管。在加热完毕后15分钟,于546nm处测吸光度。
前花青素所战百分素=
0.01389-反应混合物中样品的浓度 mg/ml。
0.366-A1%1cm在546nm处前花青素的吸光度。