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实验室常用洗涤试剂的配制和玻璃仪器洗涤方法

         常规洗涤试剂配制方法

         实验中所使用的玻璃器皿清洁与否直接影响实验结果。由于器皿的不清洁或被污染,往往造成较大的实验误差,甚至会出现相反的实验结果。因此,玻璃器皿的洗涤清洁工作是非常重要的。

玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸溜水冲洗。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干备用。

  一、洗涤液的种类和配制方法

(1)浓盐酸(工业用)

可洗去水垢或某些无机盐沉淀。

(2)5%草酸溶液

可洗去高锰酸钾的痕迹。

(3)酒精与浓硝酸混合液

最适合于洗净滴定管,在滴定管中加入3mL酒精,然后沿管壁慢慢加入4mL浓硝酸(相对密度1.4),盖住滴定管管口。利用所产生的氧化氮洗净滴定管。

(4)有机溶液

如丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗去油漆污垢。

(5)5%~10%磷酸三钠(Na3PO4·12H2O)溶液

可洗涤油污物。

(6)30%硝酸溶液

洗涤CO2测定仪器及微量滴管。

(7)铬酸洗液

(重铬酸钾一硫酸洗液,简称洗液或清洁液)广泛用于玻璃器皿的洗涤,常用的配制方法有4种:

① 取100mL工业浓硫酸置于烧杯内,小心加热,然后慢慢地加入重铬酸钾粉末,边加边搅拌,待全部溶解后冷却,贮于带玻璃塞的细口瓶内。

② 称取5g重铬酸钾粉末置于250mL烧杯中,加水5mL,尽量使其溶解。慢慢加入100mL浓硫酸,边加边搅拌,冷却后贮存备用。

③ 称取80g重铬酸钾,溶于1000mL自来水中,慢慢加入工业浓硫酸1000mL,边加边搅拌。

④ 称取200g重铬酸钾,溶于500mL自来水中,慢慢加入工业浓硫酸500mL,边加边搅拌。

(8)5%~10%乙二铵四乙酸二钠(EDTA)溶液

加热煮沸可洗去玻璃器皿内壁的白色沉淀物。

(9)尿素洗涤液

为蛋白质的良好溶剂,适用于洗涤盛蛋白质制剂及血样的容器。

(10)氢氧化钾-乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液

它是两种强碱性的洗涤液,对玻璃器皿的侵蚀性很强,清除容器内壁污垢,洗涤时间不宜过长。使用时应小心谨慎。

上述洗涤液可多次使用,但使用前必须将待洗涤的玻璃器皿先用水冲洗多次,除去肥皂液、去污粉或各种废液。若仪器上有凡士林时,应先用软纸擦去,然后再用乙醇或乙醚擦净。否则会使洗涤液迅速失效。例如肥皂水、有机溶剂(乙醇、甲醛等)及少量油污物均会使重铬酸钾-硫酸液变绿,降低洗涤能力。

  二、初用玻璃器皿的清洗

新购买的玻璃器皿表面常附着有游离的碱性物质,先用肥皂水(或去污粉)洗刷,再用自来水洗净,然后浸泡在1%~2%盐酸溶液中过夜(不少于4h),再用自来水冲洗,最后用蒸馏水冲洗2~3次,在100~130℃烘箱内烘干备用。

  三、使用过的玻璃器皿的清洗

  (1)量器

如吸量管、滴定管、量瓶等。使用后应立即浸泡于凉水中,勿使物质干涸。工作完毕后用流水冲洗,以除去附着的试剂、蛋白质等物质,晾干后浸泡在铬酸洗液中4~6h(或过夜),再用自来水充分冲洗,最后用蒸馏水冲洗2~4次,风干备用。

  (2)一般玻璃器皿

用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油,要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次,使油垢溶解。再在肥皂水中煮5~10min,用软布或脱脂棉擦拭,立即用自来水冲洗,然后在稀洗涤液中浸泡0.5~2h,自来水冲去洗涤液,最后用蒸馏水换洗数次,待干后,浸于95%乙醇中保存备用,使用时在火焰上烧去乙醇。用此法洗涤和保存的载玻片和盖玻片清洁透亮,没有水珠。检查过活菌的载玻片或盖玻片应先在2%新洁尔灭溶液中浸泡24h,然后上述方法洗涤方法洗涤与保存。玻璃器皿经洗涤后,若内壁的水均匀分布成一薄层,表示油垢完全洗净,若挂有水珠,则还需要用洗涤液浸泡数小时,然后用自来水充分冲洗,最后用蒸馏水洗2~3次后备用。

如试管、烧杯、锥形瓶等(包括量筒)。先用自来水洗刷至无污物,再选用大小合适的毛刷蘸取去污粉(掺入肥皂粉)刷洗或浸入肥皂水内。将器皿内外,特别是内壁,细心刷洗,用自来水冲洗干净后再用蒸馏水洗2~3次,热的肥皂水去污能力更强,可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉与去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子,故要用水多次甚至10次以上充分冲洗,或可用稀盐酸摇洗一次,再用水冲洗。烘干或倒置在清洁处备用。凡洗净的玻璃器皿,不应在器壁上带有水珠,否则表示尚未洗干净,应再按上述方法重新洗涤。若发现内壁有难以去掉的污迹,应分别使用下述的各种洗涤剂予以清除,再重新冲洗。

  (3)其他

具有传染性样品的容器(如分子克隆、病毒、致病菌玷污过的容器)需要先进行高压灭菌或其他形式的消毒,再进行清洗。盛过各种毒品(特别是剧毒药品和放射性核素物质的容器)必须经过专门处理,确知没有残余毒物存在时方可进行清洗。否则使用一次性容器。装有固体培养基的器皿应先将其刮去,然后洗涤。

  四、细胞培养级玻璃器皿的洗涤处理

(1)取出,沥去多余的洗液。

(2)自来水充分冲洗。

(3)将玻璃器皿浸泡入洗液中,24~48h。注意玻璃器皿内应全部充满洗液,操作时小心勿将洗液不溅到衣服及身体各部。

(4)将玻璃器皿依次过6桶水,玻璃器皿在每桶中过6~8次。

(5)排列6桶水,前3桶为去离子水,后3桶为去离子双蒸水。

(6)按上述方法对玻璃器皿进行初洗,晾干。(7)倒置,60℃烘干。

(7)用硫酸纸包扎,180℃干烤3h。

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