A.1 仪器和用具
A.1.1 粉碎机;
A.1.2 磨口带塞锥形瓶500ml;
A.1.3 振荡器:国际型;
A.1.4 容量瓶:250ml;
A.1.5 离必机,附50ml离心管;
A.1.6 玻璃漏斗;
A.1.7 锥形瓶、移液管;
A.1.8 其他仪器和用具与本标准第1章同。
A.2 试剂
所用试剂与本标准第2章同。
A.3 操作方法
A.3.1 试样制备:将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。
A.3.2 提取:称取粉碎试样5g(W,精确至0.01g)于磨口带塞锥形瓶中,加水200ml,摇混使均匀分散,然后在25~30℃温度下振荡2h,取出后将混合液转移至250ml容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀后静置1~2min,将上层清液倒入离心管中,在每分钟转数1500转的离心机中离心10min,再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤,收集清晰滤液于锥形烧瓶中,即为样品水溶性蛋白质测定液。
A.3.3 定氮:吸取测定液10ml于50ml或100ml凯氏定氮瓶中,按本标准3.1、3.2、3.3步骤进行消化蒸馏、滴定。记下滴定样品液及空白液消耗盐酸的数量。
A.4 结果计算
(兰冠教育职业技能培训中心供图)
式中:V1—测定5ml样品液消耗盐酸体积,ml;
水溶性蛋白质含量按下列公式计算:
V0—测定5ml空白液消耗盐酸体积,ml;
N—盐酸溶液的当量浓芳度,N;
0.014—每毫克当量氮的克数;
6.25—大豆含氮量换算成蛋白质系数;
10—吸收提取液进行消化的体积,ml;
250—总提取液的体积,ml;
5—吸收消化液进行蒸馏的体积,ml;
50—总消化液的体积,ml;
W—试样重量,g;
M—试样水分百分率,%。
双试验结果允许差不超过0.4%,求其平均数,即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。
注:①大豆氮可溶解指数(%)的计算方法是:以所测得的大豆水溶性蛋白质(%)除以大豆总蛋白质(%),再乘以100即得。
②本方法采用样品制备方法及提取方法使测定结果较为稳定,但如因粉碎样品细度达不到要求,则可采用称取试样5.00g于研钵中,加5ml水,用手研磨10min,将混合物用200ml水转移至250ml磨口瓶中,再在振荡器上振荡30min,然后同本标准3.2进行定容、离心、过滤、定氮。
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