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还原糖测定规则

一、方法原理：

斐林氏A、B液混合时，生成天兰色氢氧化铜沉淀并立即与酒石酸钾钠起反应，生成深兰色氧化铜和酒石酸钾钠的络合物～酒石酸钾钠铜，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，生成红色的氧化亚铜沉淀，而氧化亚铜与亚铁氢化钾反应生成无色的络合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将兰色的亚甲基蓝还原为无色。

二、仪器及试剂：

仪器：容量瓶100mL；滴定管25mL；三角瓶250mL；吸管2mL、1mL；量筒50mL；定量吸管5mL；300W电炉；滴定装置。

试剂：

斐林氏A液：

称取35g硫酸铜、0.08g亚甲基蓝，加水溶解定容至1000mL。

斐林氏B液：

称取126g氢氧化钠、117g酒石酸钾钠、10g亚铁氰化钾，分别溶解后混合定容至1000mL。

0.1%标准葡萄糖溶液：

精确称取1.0000g葡萄糖(105℃干燥2小时)，加1mL盐酸溶解定容至1000mL。

三、分析步骤：

空白滴定：

１、以定量吸管吸取斐林氏A、B液各5mL于250mL三角瓶中(斐林氏A液须精确吸取，A、B液要现混现用)；

２、预先加入约20mL0.1%标准葡萄糖溶液，混合后于电炉上加热至沸腾(溶液应在2分钟内沸腾)；

３、再以2～3秒/滴速度滴定至兰色消失为终点(滴定速度需保持一致)。

４、同一空白做两次(两次之差0.1mL之内)，取平均值(后一次滴定预加入标准葡萄糖溶液量比前一次滴定数少0.5～0.7mL)。

样品滴定：

１、以定量吸管精确吸取5mL糖液于容量瓶中，加水稀释至100mL；

２、吸取稀释样2mL(高浓度糖取1mL)于250mL三角瓶中；

３、同空白滴定步骤

(滴定时需预先加入一定体积的水，加水量与耗用标准糖液量的总和应与空白滴定耗用标准糖液体积相同)。

四、计算：

V0：空白滴定耗用标准葡萄糖溶液体积(mL)

V：样品滴定耗用标准葡萄糖溶液体积(mL)

V1：滴定时吸取稀释糖液体积(mL)(1mL或2mL)

0.1：标准葡萄糖溶液浓度(%)

5/100：糖液吸取量(mL)及稀释量(mL)

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